Bagaimana untuk mengukur pertumbuhan bakteria

Posted on
Pengarang: John Stephens
Tarikh Penciptaan: 24 Januari 2021
Tarikh Kemas Kini: 1 Julai 2024
Anonim
Cara Tumbuh Hingga Metode Pengukuran Bakteri - Pertumbuhan Mikroorganisme | Kuliah Mikrobiologi
Video.: Cara Tumbuh Hingga Metode Pengukuran Bakteri - Pertumbuhan Mikroorganisme | Kuliah Mikrobiologi

Kandungan

Dalam artikel ini: Mengamati bakteria secara langsungMengukur biomassProcedure oleh turbidimetry8 Rujukan

Terdapat beberapa cara untuk mengukur pertumbuhan bakteria, dan ada yang lebih sukar daripada yang lain untuk dilaksanakan. Yang paling mudah digunakan dan memberikan hasil yang agak tepat, dengan syarat mereka ketat semasa pengukuran. Teknik yang paling lazim adalah pemerhatian dan pengiraan bakteria, pengukuran biojisim dan biomas kering dan turbidimetri. Makmal sekolah anda perlu mempunyai peralatan yang diperlukan untuk sekurang-kurangnya satu kaedah ini.


peringkat

Kaedah 1 Perhatikan bakteria secara langsung



  1. Sediakan peralatan. Sebagai tambahan kepada apa yang biasanya terdapat dalam semua makmal biologi, anda memerlukan beberapa item tertentu. Pastikan anda mempunyai semua instrumen dan bekas di hujung jari anda yang berguna, jadi anda tidak perlu pergi balik ke dalam almari tempat peralatan disimpan. Berfikir lebih awal daripada apa yang akan anda lakukan untuk mengetahui apa yang akan anda gunakan pada setiap peringkat. Anda juga perlu mengetahui beberapa istilah utama.
    • Dapatkan hemasiometer. Ia adalah pisau dengan ruang pengiraan yang dikaitkan dengan mikroskop. Ini adalah alat yang sangat mudah untuk menyesuaikan dan menggunakan. Anda boleh menemui beberapa daripada pembekal yang mengkhusus dalam peralatan untuk sekolah dan makmal penyelidikan. Manual pengguna biasanya disediakan.
    • Ambil hidangan petri. Ini adalah bekas kecil, bulat, cetek di mana anda boleh melihat bakteria.
    • Istilah "budaya" merujuk kepada mikroorganisma yang disebarkan secara buatan sebagai sebahagian daripada percubaan saintifik.
    • "Rumput budaya" adalah medium di mana budaya akan berkembang.



  2. Gunakan hidangan petri. Letakkan bakteria di dalam kotak dan perhatikannya di bawah mikroskop. Anda juga boleh meletakkannya terus pada slaid. Kemudian hitunglah jumlah sel bakteria yang ada.


  3. Pastikan anda mempunyai kepekatan yang betul. Sekiranya terdapat terlalu banyak bakteria, mereka akan bertindih dan anda tidak dapat mengira dengan betul. Jika ini berlaku, cairlah kebudayaan dengan mencampurkannya dengan sup sedikit. Sekiranya terdapat terlalu sedikit, hasilnya tidak bermakna. Anda mesti menapis sup untuk meningkatkan kepekatan.


  4. Kira bakteria. Langkah terakhir hanya untuk dikira. Lihat bilik count di bawah mikroskop dan perhatikan bilangan sel yang anda lihat. Bandingkan hasil dengan pengalaman serupa yang lain.

Kaedah 2 Mengukur biomassa




  1. Semak bahawa anda mempunyai instrumen yang diperlukan. Kaedah ini perlahan untuk dilaksanakan dan melibatkan penggunaan peralatan mahal. Jika anda tidak membasuhnya, gunakan teknik lain. Sebaliknya, jika makmal yang anda ada mempunyai alat yang betul, pengukuran biomas dan jisim kering adalah ideal kerana ia memberikan hasil yang tepat. Anda perlukan:
    • ketuhar pemutus hidraulik terpaksa,
    • kuali aluminium,
    • beberapa kipas Erlenmeyer,
    • sebuah centrifuge atau sistem penapisan makmal.


  2. Semak bahawa tanaman berada dalam flask Erlenmeyer. Sekiranya ini tidak berlaku, tuangkannya. Pada tahap percubaan ini, bakteria masih dalam suplai budaya. Mereka akan dipisahkan kemudian.


  3. Keringkan kuali berat. Untuk ini, masukkannya ke dalam ketuhar. Anda juga boleh menggunakan penapis membran selulosa asetat diameter 47 mm dengan liang 0.45 μm. Mana-mana alat yang digunakan, ukur dengan jisim dengan tepat supaya ia boleh ditolak dari hasil yang anda dapatkan apabila tanaman diletakkan di atasnya.


  4. Mix. Agitate lerlenmeyer supaya budaya itu homogen. Memang, kerana graviti, sel-sel secara semula jadi cenderung jatuh ke bahagian bawah bekas. Oleh itu, anda perlu berjabat sedikit yang diedarkan dengan cara yang seragam dan sampel anda lebih mewakili.


  5. Centrifuge. Menggunakan emparan, memisahkan bakteria daripada sup kultur. Peranti ini digunakan untuk menghidupkan bekas dan pengimbang pada kelajuan yang sangat tinggi. Aliran kaldu, yang hanya menyimpan benda hidup. Untuk mendapatkan maklumat lanjut, anda akan mendapat maklumat bagaimana menggunakan centrifuge di internet.


  6. Dapatkan doh. Jatuhkan pada kuali berat. Anda boleh membuang sup budaya, anda tidak akan memerlukannya lagi, tetapi teruskan lerlenmeyer di tangan.


  7. Bilas centrifuge itu. Tuangkan air bilas pada kuali seberat sel bakteria. Hasil yang diperoleh untuk semua memberikan anda biomas.


  8. Cari jisim kering. Untuk mengetahui biomas kering sampel anda, letakkan tumit seberat dalam ketuhar yang ditetapkan pada 100 ° C untuk tempoh 6 hingga 24 jam, mengikut arahan yang dibekalkan dengan peranti anda. Berhati-hati agar tidak melebihi suhu ini untuk mengelakkan bakteria terbakar. Kemudian timbanglah segala-galanya, kemudian tolak massa dulang itu.

Kaedah 3 Teruskan oleh turbidimetri



  1. Sediakan peralatan anda. Anda memerlukan sumber cahaya dan spektrofotometer, peranti yang terdapat di kebanyakan makmal sains. Rujuk kepada manual pengguna yang dibekalkan kerana setiap model mempunyai operasi sendiri. Kaedah ini adalah salah satu yang paling kerap digunakan untuk mengukur pertumbuhan bakteria, kerana ia hanya memerlukan alat yang murah dan mudah digunakan.


  2. Bawa cahaya ke dalam budaya. Kekeruhan digunakan untuk menilai kandungan cecair dalam zarah-zarah, ia menentukan sama ada ia lebih atau kurang mendung. Hasil yang anda dapat dari pengukuran ini akan diberikan dalam NTU (atau Unit Kekerasan Nephelometric). Ia mungkin perlu dilakukan penentukuran peranti untuk mengukur kekeruhan sampel secara tepat.


  3. Ambil nota. Kekeruhan adalah jumlah bakteria dalam sampel. Spektrofotometer juga akan membolehkan anda mengetahui pemindahan penyelesaian (% T), yang nilainya berkadar berbanding kekeruhan. Kemudian bandingkan hasil yang diperoleh pada sampel yang berbeza untuk mengukur pertumbuhan bakteria.